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浮游生物的定量测定
发布时间:11/24/2011 9:20:15 AM
浮游生物的定量测定
一、实验目的
1、 掌握并熟悉视野计数法测量微生物的操作过程
2、 通过定量测定来评价水体的水质情况
二、实验原理
2.1视野计数法
先用台微尺测出
显微镜
视野的直径,然后算出事业的面积,再用S-R计数框或网格计数框计数。计数时以视野为单位。其计算公式如下。
每毫升中浮游生物个数=1000C/ADF
式中 A_____一个视野面积,mm2
D_____视野的深度,mm;
F_____计数的视野数,一般至少10个;
C_____计数的生物个数。
藻类和原生动物的计数可用此法。计数时一般吸取0.1mL样品注入0.1mL计数框内,在10*40倍和8*40倍显微镜下计数,藻类计数100个视野,原生动物全片计数。
三、实验仪器与试剂
3.1采样仪器:采水器,浮游生物定量网
分析仪器:显微镜,S-R计数框(赛琪维克-拉夫计数框)
3.2试剂:鲁哥液(碘化钾60克溶于200mL蒸馏水中,加碘40克,溶解后,加蒸馏水至1000mL); 4%的福尔马林(福尔马林4mL、甘油10mL、水86mL)或70%酒精
四、水样的采集
采集定量样可用采水器和定量网,常用的是采水器。采集水样的量要根据浮游生物的密度和研究的需要而定。一般来说,浮游生物密度低水量就要多。对于藻类,一般采水1~2L;对原生动物、轮轮虫及未成熟的微小甲壳动物,采水1~5L;成熟的甲壳动物则要10~50L.
如用定量网采样定量水样,可选这是当型号的网,放入距水底0.5mL处,然后垂直上托,以0.5m\s的均匀速度托取,所采水样的体积可按下列公式推算出来。
水样体积=πr2H\
式中 r____网口半径;
H____托取的深度。
四、样品的固定、浓缩和保存
定量样品经固定后,还要进行浓缩,浓缩常用的方法是沉淀法。如无沉淀器可用烧杯或大体积(1000mL)分液漏斗代替,沉淀24~48h。沉淀中途可轻轻摇动沉淀器一次,使粘在器壁上的生物脱落下沉,然后用虹吸管(橡皮膏,内径3~5mm左右)小心缓慢地抽掉上层清液,一般以吸完980mL上清液需20~30min为宜。虹吸管Zui好用25号筛绢扎在管口,以防止水样中的生物流失,余下的20mL左右沉淀物摇动均匀转入30mL容量瓶或量筒中,为减少样品损失,再用少量上清液冲洗沉淀器两次,冲洗液加到容量瓶中,Zui后加到30mL。为使样品能较长时间保存,可补加1mL4%左右的福尔马林,贴好标签,密封保存。另外,也可将定量样品用滤纸、筛绢或过滤器浓缩,然后定容至30mL。还可以通过过滤活力新的方法浓缩水样。
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