生化反应
生化试验证明存在的微生物细胞内的酶系统,如那些负责发酵的碳水化合物或蛋白质的分解,使个别品种的微生物可确定。注意到在纯培养的细菌在显微镜下研究特定的酶的存在,通常可以识别。
微生物技术的小型化,是指使用的预先包装的商业测试单位,其中一个给定的生化反应的基本试剂的预测,规范化,成片剂或压缩到一个文件的磁盘或滤纸条。测试装置适用于液体或固体介质中的文化和设计是化学测试生物体的酶,使行动通常在颜色的变化,或终点,在显微镜下快速和容易的观察结果。提供这种测试有许多品种。
糖类发酵
微生物发酵许多有机化合物,包括碳水化合物,在这个过程中的能源丰富的化学键产生。通过发酵单糖可以作为许多种不同的微生物对能源的主要来源。在基板上取决于发酵的Zui终产品,目前酶,以及在何种条件下反应所得。例如,酵母酶,葡萄糖分解成二氧化碳和酒精有没有蔗糖(蔗糖)的效果,而酶的肺炎链球菌和其他链球菌乳酸发酵葡萄糖生产。细菌发酵产品,乳酸,甲酸,乙酸,丁酸,丁醇,丙酮,酒精,和气体二氧化碳和氢气。
发酵反应,不同种微生物,其中,使用显微镜鉴别物种的巨大价值。从他们对一个给定的糖的具体行动,在实验室中,细菌(和其他微生物)(1)那些不发酵糖,(2)那些发酵酸只生产它列为,(3 )的发酵酸和天然气的生产。含糖媒体接种的细菌(或其他测试微生物)和观察到的气体和酸形成。在液体介质中的天然气产量是检测气体的积累,取代封闭在一个特殊的管臂中的流体介质,在史密斯发酵管,然后在显微镜下检查。气可检测较大的管内的液体培养基放置在一个倒置的位置在一个小管(一端是密封的关闭)。在接种液体气体形成,它收集在小管内的文化深处,向被困的小管密封年底上升。
一是接种暴跌直针深入到中期,被称为“刺伤”机动,并在显微镜下检查,那么携带一些细菌(或其他测试微生物)的固体发酵研究媒体。固体培养基也可能被熔化,冷却到42 ° C,再接种。
在固体介质中,天然气生产被视为扰乱气体介质的气泡。酸的形成是在液体和固体介质测量pH值指标纳入其中的颜色变化。许多碳水化合物是在例行的发酵研究。重要的糖是葡萄糖,乳糖,麦芽糖,蔗糖,木糖,甘露醇,和杨素。发酵乳糖是识别细菌从肠道恢复是至关重要的,因为它使的致病性大肠菌生物体,这迅速发酵乳糖,和的致病物种,如沙门氏菌和志贺氏菌,它可以不发酵乳糖(带之间的一个部门除少数例外)。
水解淀粉
当淀粉琼脂培养基上生长的微生物,在显微镜下看到的,是的,明确区域发展围绕那些消化淀粉的殖民地。如果琼脂覆盖弱解的碘,未消化的淀粉呈蓝色。
液化明胶
明胶介质中被刺伤接种有细菌线就可以了,在20 ° C孵育,观察和液化。可能孵育37 ° C(在此温度下液化明胶),然后放入冰箱,unliquefied明胶凝固。应持续至少2周孵化,除非在此之前,液化的发生,与未接种明胶管应作为控制孵育。
柠檬酸利用
由细菌利用柠檬酸是由西蒙斯的柠檬酸琼脂,商用准备的测试中,为绿色包含作为氮源和柠檬酸钠为碳的唯??一来源磷铵接种。如果测试微生物具有运输到细胞的柠檬酸酶通透,中期变成碱性,从原来的绿色转向了深刻的普鲁士蓝。测试是有用的,在一定大肠菌群的分化,肠杆菌属,克雷伯菌属,大肠埃希氏菌,可以使用柠檬酸作为唯Yi的碳源,哪些不能。
吲哚生产
吲哚(色氨酸)的生产是由介质中含有色氨酸,使用显微镜测试生物体的文化。反应介导的。“色氨酸”任期酶负责完成系统。与草酸饱和溶液浸泡的滤纸条,可挂在文化,并在地方举行的棉塞或文化管的螺丝帽。一个粉红色的纸张上表示吲哚生产。当科瓦奇试剂(paradimethyl氨基苯甲醛溶于戊醇与浓盐酸)加入肉汤,红色表示吲哚生产。重要的吲哚生产者是大肠杆菌和变形杆菌,如饥似渴地分解蛋白质。
细菌产生的蛋白水解酶(蛋白分裂酶,蛋白酶)分割成蛋白酶,蛋白胨,多肽,氨基酸,氨和游离氮复杂的蛋白质。被称为蛋白质的分解腐烂。有些当局限制长期的厌氧细菌的蛋白质,它的结果,硫化氢等foulsmelling分解产物的形成分解腐烂,他们利用好氧菌分解蛋白质的长期衰减。后者并不导致形成恶臭的分解产物:
硝酸盐还原
硝酸盐还原是指从激进的硝酸盐转化为亚硝酸盐(NO2)它的氧气去除。介导的反应是由多种微生物产生的酶nitratase。测试生物培养发酵液中含有0.1%的硝酸钾和亚硝酸盐与对氨基苯磺酸和α- naphthyfamine试剂测试肉汤。一个红色的颜色是一个积极的的测试。
脱氧核糖核酸拟订
生产的脱氧核糖核酸(DNA酶)是证明文化测试微生物已添加脱氧核糖核酸(DNA)的琼脂表面上。经过24小时的潜伏期,表面上是或者1N盐酸淹没,突出对DNase的正增长,或用0.1%甲苯胺蓝,在这种情况下,明亮的玫瑰粉红色的明确区是终点,即表示DNA酶的存在。葡萄球菌产生这种酶。
硫化氢生产
刺文化中包含基本的醋酸铅或铁醋酸琼脂培养1至4天,然后在显微镜下检查。硫化氢介质的含硫氨基酸的生产是由外观黑色化合物,硫化氢与铅(或铁)醋酸结合形成硫化铅(或硫化铁)表示。而是被纳入到中期,基本醋酸铅可浸渍在无菌滤纸条,暂停在中吲哚生产测试。硫化氢的生产方便了布鲁氏菌物种的鉴定和肠道杆菌。
尿素分裂
某些细菌(例如,变形)转换为尿素,合成氨生产尿素酶。酚红作为指标,尿素酶的存在`红色的外观。此测试有助于分开的尿素酶阴性的沙门氏菌和志贺氏菌的种属变形。
消化牛奶
在无菌奶的细菌的生长,可能是碱性或酸性,或没有令人毛骨悚然。令人毛骨悚然的可能或可能不会遵循的酪蛋白凝乳液化。由产气荚膜梭菌产生的牛奶中过多的天然气生产被称为暴风雨发酵。
氧化酶反应
酶氧化酶是由奈瑟菌种,其巨大的价值鉴定淋球菌的检测。氧化酶试剂(N,N -二甲基- P -苯基enediamine manohydrochloride)阳性菌落为黑色,粉红色到红色的色彩。
烟酸测试
烟酸测试是区别于其他物种的分枝杆菌结核分枝杆菌。 4%的酒精苯胺溶液和溴化氰(注对人类的毒性)10%的水溶液中添加1或2毫升。乳化细菌的生长。烟酸或烟酸,由结核杆菌的形成,而不是由其他分枝杆菌,与溴化氰和伯胺发生反应,形成一个复杂的黄色复合。
奥普托欣生长抑制试验
奥普托欣生长抑制试验是由6毫米吸水纸接触,在纯文化的沉重与测试链球菌接种在血液琼脂平板上,孵育过夜奥普托欣盐酸)的磁盘位置。一个区的抑制大于18毫米。确定肺炎球菌的生长,而对其他链球菌区,如果存在的话,要小得多。目前,这是区别于其他α-溶血性链球菌肺炎双球菌的使用Zui广泛的的测试。
过氧化氢酶试验
过氧化氢酶试验是由浇筑过氧化氢的增长的一个严重的接种,18 - 24小时琼脂斜面,然后放置在倾斜位置,表现出很好的氧气气泡的快速发展,积极的反应管。氢转移呼吸氧气的微生物,可能会导致过氧化氢的生产,这是有毒的微生物细胞。大多数有氧,但不厌氧细菌产生一种酶,过氧化氢酶,过氧化氢的氧化成水和氧气。葡萄球菌是过氧化氢酶阳性;链球菌过氧化氢酶负;抗酸杆菌产生过氧化氢酶和过氧化氢酶活性的检测分枝杆菌的实验室评估中非常有用。