显微镜的主要技术参数
一、数值孔径
● 数值孔径Numerical Aperture (NA)简写NA，是衡量物镜或聚光镜性能高低的重要指标（尤其对物镜而言） 。其数值的大小，分别标刻在物镜和聚光镜的外壳上。
● 数值孔径Numerical Aperture (NA) 是物镜前透镜与被检物体之间介质的折射率（n）和孔径角（u）半数的正弦之乘积。用公式表示如下：NA=nsinu/2。
● 目前市面上出售的物镜，干镜的数值孔径Zui大可达 0.95，水镜的数值孔径Zui大可达 1.2，油镜数值孔径可达 1.45
● 数值孔径与其他技术参数有着密切的关系。与分辨率成正比，与放大率成正比，与焦深成反比，NA值增大，视场宽度与工作距离都会相应地变小。
二、分辨率Resolution
（一）分辨率：是衡量显微镜性能的一个重要技术参数。往往用Zui小分辨距离来表示。在显微镜的设计中确定，当Zui小点的衍射斑象的中心刚好落在另一个衍射 斑象的边缘，则认为两物点象刚刚能够被分辨；这就是可以分辨的Zui小距离计算公式：σ=λ/NA（λ为照射光波长，NA为显微镜物镜的数值孔径）
（二）物镜的数值孔径越大，点光源像的Airy Disk 就越小，物镜的分辨率也
越高( σ= λ/NA)
（三）.几个重要的分辨率
人眼：0.2mm
光学显微镜：0.2um （在紫外光单色光照明情况下）
电子显微镜：0.2nm
三、放大率
总放大率M=Mob（物镜放大率）×Moc（目镜放大率）
*Mob=△/F1
(△为标准镜筒长度160毫米；F1为物镜的焦距)
*Moc=250/F2
(250为人的明视距离，单位为毫米,F2为目镜的焦距)
四、焦深（Depth of Focus)
● 焦深为焦点深度的简称，即在使用显微镜时，当焦点对准某一物体时，不仅位于该点平面上的各点都可以看清楚，而且在此平面的上下一定厚度内，也能看得清楚，这个清楚部分的厚度就是焦深。
● 焦深大, 可以看到被检物体的全层；而焦深小，则只能看到被检物体的一薄层
● 焦深与其他技术参数有以下关系：
（1） 焦深与总放大倍数及物镜的数值孔径成反比。
（2） 焦深大，分辨率降低。
（3）焦深计算公式：D= K.η/M.NA其中，K：常数为240微米，η：被检物体周围的折射率M：总放大率， NA：物镜的数值孔径
五、视域直径（Field Of View）
视域直径也称视域宽度，是指在显微镜下看到的圆形视场内所能容纳被检物体的实际范围，视域直径越大，越便于观察。
计算方法：φ= FN /Mob，
φ：视域直径； Mob：物镜放大率
FN：视域直径数field of view number，是目镜的固定参数，标刻在目镜的外面；
视域直径数（field of view number , F.N.)是反映目镜能观察到的Zui大的视场直径。越大，则可在同一视野内看到更多的范围。如下图所示。目前OLYMPUS标准套的目镜视场数为22，26.5则为超宽视场的目镜
标本的视场直径 = 目镜视域直径数 / 物镜倍率
例: WH10X目镜视场数为22，物镜为UPLFL40X
标本的视场直径 = 22 ÷ 40 = 0.55mm
六、覆盖差
盖玻片的标准厚度为0.17mm，许可范围在0.16-0.18mm
*显微镜的光学系统也包括盖玻片在内。由于盖玻片的厚度不标准，光线从盖玻片进入空气产生折射后的光路发生了改变，从而产生了相差，这就是覆盖差。覆盖差的产生影响了显微镜的成响质量。
*国际上规定，盖玻片的标准厚度为0.17mm，许可范围在0.16-0.18mm，在物镜的制造上已将此厚度范围的相差计算在内。物镜外壳上标的0.17，即表明该物镜所要求的盖玻片的厚度。
*校正物镜上带有校正环，可以校正不同厚度盖玻片引起的覆盖差， 如此物镜可校正0.11 ~ 0.23范围。
七、工作距离(W.D)
*工作距离（缩写W.D.）也叫物距：物镜前透镜表面到标本之间的距离。镜检时，被检物体应处在物镜的一倍至二倍焦距之间。因此，它与焦距是两个概念，平时习惯所说的调焦，实际上是调节工作距离。
*数值孔径大的高倍物镜，其工作距离小。
*由于物镜有工作距离的限制，在观察不同标本的时候就要注意物镜的工作距离。比如，观察培养瓶内底部的细胞时，由于正置显微镜的物镜工作距离不够，就需要用倒置显微镜从底部向上观察。
八. 同焦距（齐焦距离)
同焦距（Parfocality)即不同倍率的物镜之间保证相同的焦距。使用中表现为，不同倍率之间转换物镜时，焦距应该不会偏离很多。现在新的光学系统中，大部分都可以保证比较好的同焦距，不会出现转换倍率后焦距差异很大的情况。
九. 同轴度
同轴度是指不同倍率的物镜之间中心的重合程度，使用中表现为不同倍率转换时，中心的图象不会偏离太远（在误差允许范围内）。如果出现转换物镜后，中心严重偏离则是同轴度不合格。