荧光显微镜汞灯的使用和维护

2016-04-06技术资料

显微镜下,由于某些物质的光学特性,普通正置显微镜不能看清楚其内部结构,而其拥有另外一种特性,比如细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,利用这种物质的光学特性,研发出了专业的显微显示设备,即荧光显微镜。荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具。荧光显微镜的准确定义是指选择由高压汞灯或类似光源发出的一定波长的激发光,激发细胞中某些被荧光染料标记的物质发射荧光,观察细胞某种特异成分的分布状态的显微镜。也可进行半定量测定。奥林巴斯推出的荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。

汞灯中心调节图
一般奥林巴斯BX43或者BX53都可以通过添加荧光附件来进行荧光检测,添加了荧光附件的奥林巴斯荧光显微镜和普通显微镜有以下的区别:
1.照明方式通常为落射式,即光源通过物镜投射于样品上;
2.光源为紫外光,波长较短,分辨力高于普通显微镜;
3.有两个特殊的滤光片,光源前的用以滤除可见光,目镜和物镜之间的用于滤除紫外线,用以保护人目。
奥林巴斯荧光显微镜也是光学显微镜的一种,主要的区别是二者的激发波长不同。由此决定了荧光显微镜与普通光学显微镜结构和使用方法上的不同。
奥林巴斯BX53荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。其被广泛的运用在生物学、医药研究领域。
奥林巴斯荧光显微镜使用的汞灯目前为50W超高气压汞灯,灯管内通有一对钨电极和液态汞(室温下附在管壁上),未点燃时,管内气压很低,在灯管的两电极间施加电压角发点燃后,汞气化为汞蒸气形成汞弧而产生强光,温度升高,管内气压迅速升到10个大气压。由于是高气压的气体放电,必须了解其特性才能安全地使用汞灯。 a. 汞灯接通电源后需要10-15min预热时间,汞才能充分汽化并形成汞弧,产生高亮度而稳定的激发光。因此,观察前要提早通电; b. 汞灯在使用过程中,不要随意开关汞灯的电源; c. 关掉汞灯电源后,必须等待15-20min,待汞灯自燃冷却后才可再次接通电源,违反这一操作规定时,将会造成严重后果! 由于汞灯内的汞蒸气未完全液化,汞蒸气内阻很小,一旦通电在两电极间施加电压,汞灯内形成强大的电流,轻则烧断保险丝或烧毁汞灯电源中的扼流圈,重则汞灯爆炸,汞蒸气弥漫整个实验室,造成工作人员中毒,不仅损失了汞灯,还会炸毁灯室内的集光-聚光部件。 d. 汞灯的使用寿命一般只有300h,使用得当可600h,使用寿命与开关的次数成反比,应集中一批样品作2-3h的观察。汞灯价格及昂贵,应珍惜使用。 e. 汞灯寿命终结的标志是点燃困难,灯管发黑。
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