想要设计引物 可是NCBI中blast后只有蛋白序列 如何得到基因序列,我是想从一种真菌中P一个基因,但是找到了几个类似的,只能得到它的蛋白序列,却找不到基因序列 ,想问下虫友们,如何找到啊,或者是否能从蛋白序列去设计引物。
有段测序后的基因,其中有处是CTG,按密码子应该是D才对。但用PRIMER5整段翻译出来后却把他翻译成了E,这是为什么呢?而且查了文献,那个位置确实是E,弄不明白了啊。。。。我把软件的截图也放上好了,有问题的是蛋白的第71个氨基酸。
取4支洗净供干的20mL具塞刻度试管,编号后各加入50mg处理过的无淀粉新华滤纸,加入1.5 mL 0.05M pH4.8的醋酸一醋酸钠缓冲溶液,并向1号试管中加入2mLDNS溶液以钝化酶活性,作为空白对照,比色时调零用。将4支试管同时在50 ℃水浴中预热5-l0min,再各加入适当稀释后的酶液0.5 mL,50 °C水浴中保温30 min。
不一定。菌种不知名,那知不知道菌属?如果完全什么都不知道,那就只能慢慢试了。如果要测定生长曲线,菌种也是先要活化的。所以不是非要知道生长曲线才能做活化的,活化时间也不只是一个点,是一个时间段,这个时间段有的也很长的。
我在寒假前配了一批APW培养基保存在4度冰箱里,现在过去一个月了,培养基看起来跟年前没有任何变化,我能灭次菌接着再用吗?
糖尿病是世界范围Zui常见的流行病之一,已经成为继心血管、肿瘤之后的第三大严重威胁人类健康的非传染病。当前,防治糖尿病是人类在和平生活中面临的一个重大健康课题,无论在发达国家还是发展中国家,居高不下的糖尿病患病率和逐年递增的发病率,日益威胁到各地区人民的正常生活。
不同菌株诱导温度不同的吧……测大肠杆菌的紫外的吸光度,看其480波长的吸光度大于0.8就可以了。测吸光值,是比较可靠的办法,有個簡單的辦法,(只適用于500ml裝100ml培養基的三角瓶)把養菌的瓶子放在手上,從側上觀察,看不清楚手心為佳!
小妹的分析样品是活性污泥,这学期开始针对V6区做PCR-DGGE,可是一直都是引物二聚体,引物是968GC/1401R,降落PCR,退火是68℃-58℃ 1min,20循环,再68℃ 1min 15循环,退火温度设梯度做还都是二聚体,这学期都要结束了,那个急啊!!小妹对分子生物学实验还是初涉,请各位大侠哥哥姐姐们帮帮忙,感激不尽啊!!
我现在做原核表达。经过了几个月,终于能够成功表达与目的蛋白大小相符的蛋白了,但是仿佛没有活性。我是用液氮-37℃水浴反复冻融5次裂解细胞收集粗酶液的,请问大家,蛋白没有活性有没有可能是在冻融中失活呢,或者有别的原因吗?