PCR产物拖带怎么办?

2016-10-25技术资料

【求助/交流】为什么我的PCR产物拖带

我在筛选引物的过程中,做PCR,但是电泳有条带,但条带拖尾很严重,尝试看很多不同的条件,但是怎么还是拖带,哪位高人指点一下,这是为什么啊
 
提高退火温度试试
 
LZ说尝试了很多的条件,具体可以说一下么?
再有,上图吧,直观
旋之木

根据引物算退火温度的范围都试了,还有touchdown

 
这是我的电泳图,Zui左边两个是一个样品里提出的DNA,中间两个是另一个样品的DNA,Zui右边是marker.望专业人士解答
楼主用的是什么引物啊?从你的图里看感觉不光是拖尾,样品里有好些条带还是很清楚的。不知道你是不是用的box-pcr的引物。另外我以前做pcr拖尾的原因是DNA提取样洗的不干净,结果PCR跑出来没有特别量的条带,但跑得涌到整个一条都很亮。和你的图有些类似
 
我这不是box-pcr的引物,第一个样品是用切胶纯化的,后面是过的树脂柱子,不知道是不是有影响

这是我的电泳图,Zui左边两个是一个样品里提出的DNA,中间两个是另一个样品的DNA,Zui右边是marker.望专业人士解答
同意上面说的,这个图的主要的原因应该是杂带;模板不纯的可能性比较大。
 
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